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超聲波細胞破碎儀是(shi)(shi)一種(zhong)先進(jin)的(de)(de)(de)(de)實驗室設備,廣泛(fan)應用于生(sheng)物(wu)、化(hua)學和醫學研(yan)究領域。它的(de)(de)(de)(de)主要(yao)功能(neng)是(shi)(shi)通(tong)過(guo)高頻超聲波(bo)的(de)(de)(de)(de)作用,將(jiang)細胞(bao)膜(mo)破裂,從而(er)釋(shi)放出細胞(bao)內的(de)(de)(de)(de)蛋白(bai)質、核酸及其他重要(yao)的(de)(de)(de)(de)生(sheng)物(wu)分子,這為后續(xu)的(de)(de)(de)(de)生(sheng)物(wu)分析提供(gong)了(le)極大的(de)(de)(de)(de)便利。超聲波(bo)細胞(bao)破碎的(de)(de)(de)(de)過(guo)程通(tong)常是(shi)(shi)迅速(su)而(er)有效的(de)(de)(de)(de),能(neng)夠保持(chi)樣本的(de)(de)(de)(de)完整性,減(jian)少(shao)因(yin)過(guo)度破碎而(er)引起的(de)(de)(de)(de)物(wu)質降解(jie)。
細胞超聲破碎儀的使用方法
使用(yong)細胞超聲破(po)碎(sui)儀(yi)的步驟如下:
準備階段:
確保超(chao)聲(sheng)波細胞破碎儀完好無損,并準備所需的超(chao)聲(sheng)探頭、試(shi)管(guan)、研缽等樣(yang)品容器(qi)。
根據(ju)實驗設計(ji)準備好所需的緩沖液(ye)和其他(ta)輔助試劑。
連接儀器:
將超聲波(bo)細胞破碎儀(yi)的(de)電(dian)(dian)源線連接好(hao),接通電(dian)(dian)源,按儀(yi)器開機鍵,電(dian)(dian)源指示燈亮。
把(ba)與變(bian)(bian)幅(fu)(fu)桿相(xiang)連(lian)的(de)(de)(de)換能器放入(ru)隔音箱頂(ding)部的(de)(de)(de)專用插孔內,調節隔音箱內的(de)(de)(de)升降臺以確定變(bian)(bian)幅(fu)(fu)桿在(zai)容(rong)器中的(de)(de)(de)高(gao)低位(wei)置,使其在(zai)容(rong)器的(de)(de)(de)中心位(wei)置,變(bian)(bian)幅(fu)(fu)桿與容(rong)器壁不能相(xiang)接觸。
樣品處理:
選擇(ze)合適的(de)(de)樣品(pin)容器,并根據實驗需要調整樣品(pin)的(de)(de)數量和濃度。
在樣品容器中(zhong)添加(jia)適量的緩(huan)沖液(ye)或其(qi)他試劑,以保持(chi)樣品在超聲處理(li)過程中(zhong)的穩定(ding)性(xing)和(he)活(huo)性(xing)。
設置參數:
根據細胞(bao)破(po)碎量的(de)多少、時間長(chang)短、功率大小,選擇合適(shi)規格的(de)變幅桿(gan)型號。
設定儀(yi)(yi)器(qi)的輸出功率、工(gong)作(zuo)間(jian)(jian)隙時間(jian)(jian)、工(gong)作(zuo)次數。通常,超聲時間(jian)(jian)不(bu)宜(yi)過(guo)長,控制在1-5秒(miao)為宜(yi),間(jian)(jian)隔時間(jian)(jian)在5秒(miao)以(yi)下。具體設置(zhi)請參(can)照儀(yi)(yi)器(qi)說明書。
超聲處理:
將樣品容器放置在超聲細(xi)胞破碎機的樣品架中,并確保樣品能(neng)夠充分暴露在超聲波中。
將超聲探頭(tou)放入樣(yang)品容器中,確(que)保探頭(tou)與樣(yang)品充分接(jie)觸。
按(an)(an)儀(yi)器的(de)(de)復位按(an)(an)鈕,然后按(an)(an)啟動/暫停鍵開始超聲(sheng)粉碎。待設定的(de)(de)間(jian)(jian)隙時(shi)間(jian)(jian)過后,儀(yi)器即進入(ru)振蕩狀態,顯示屏會顯示工作時(shi)間(jian)(jian)、間(jian)(jian)隙時(shi)間(jian)(jian)及工作次數(shu)。
如(ru)需暫停,可再次按啟(qi)動(dong)/暫停鍵;如(ru)需重復試驗,按復位按鈕并重復上述工(gong)作。
后續處理:
完成超聲處理后,將樣品從超聲細胞破碎(sui)機中取出,并進行必要(yao)的(de)離心或(huo)過濾等操作(zuo),以分離目標物質。
處(chu)理樣品中可能存在的殘余細胞碎片(pian)或其他雜(za)質,然后進行下(xia)一(yi)步(bu)的實驗操作,如蛋白質鑒定、核酸(suan)提取等。
清潔與維護:
使(shi)用(yong)完畢后(hou),用(yong)酒精或清水清潔(jie)變幅桿(gan)探(tan)頭。
注(zhu)意(yi)超聲波細胞(bao)破碎(sui)儀應安放在(zai)干凈(jing)、干燥(zao)處,避免潮(chao)濕、高溫、灰塵及有腐蝕性(xing)氣體的環(huan)境(jing)。
超聲(sheng)破碎儀破碎細(xi)胞(bao)需要的時間
超(chao)聲破(po)碎儀破(po)碎細胞(bao)的時間需求因不同類型(xing)的細胞(bao)而(er)異:
真菌和細(xi)菌:這些細(xi)胞由于結構較為(wei)簡單(dan),一般需要破碎15-60秒。
哺乳動物細胞(bao):這類(lei)細胞(bao)的破(po)碎時間(jian)(jian)一般在30秒(miao)至3分鐘之(zhi)間(jian)(jian),具體時間(jian)(jian)取決于細胞(bao)類(lei)型(xing)、細胞(bao)密度和超聲波(bo)的參數設置。
植(zhi)物細(xi)胞:由于植(zhi)物細(xi)胞的(de)細(xi)胞壁比較堅硬,因此破碎(sui)時間一般(ban)比哺乳(ru)動物細(xi)胞長,大約需要5-10分鐘。
請(qing)注意,上述時間僅供參考,實際使用時可能需(xu)要(yao)根據實驗條(tiao)件和(he)(he)具體要(yao)求進行(xing)調整。此外,超聲波破碎器的功率(lv)也是影(ying)響細胞(bao)破碎效(xiao)率(lv)的關(guan)鍵因素之(zhi)一,具體設置也需(xu)參照儀器說明書和(he)(he)實驗需(xu)求進行(xing)。
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